目前檢測HIV的方法有100多種，可以分為抗體檢測和病毒檢測兩大類。
病毒檢測：包括細(xì)胞培養(yǎng)(病毒分離)、p24抗原檢測和病毒核酸檢測。早期對HIV的診斷主要是通過血清學(xué)試驗(yàn)檢測抗艾滋病的抗體,間接地診斷HIV感染。隨著生物科技的發(fā)展，近年來分子生物學(xué)方法不斷被應(yīng)用到HIV的檢測中，尤其核酸檢測已經(jīng)成為了HIV實(shí)驗(yàn)室診斷的發(fā)展方向，它可直接檢查HIV RNA,可在發(fā)現(xiàn)血清學(xué)變化之前檢測艾滋病感染,而且比P24抗原檢測方法更靈敏。
抗體檢測：艾滋病抗體一般在人感染后幾周逐漸出現(xiàn),可延續(xù)至終生，血清學(xué)試驗(yàn)分為初篩和確認(rèn)試驗(yàn)。最常用的初篩試驗(yàn)和確認(rèn)試驗(yàn)分別是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫印跡試驗(yàn)(WB)。常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)(WestBlot)、間接免疫熒光法(IFA)�？焖贆z測方法：明膠顆粒凝集試驗(yàn)、斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)、P24抗原的檢測、分子生物學(xué)方法、RT?PCR檢測法、熒光實(shí)時PCR檢測技術(shù)、支鏈DNA(bDNA)、連接酶酶促鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(LCR)、核酸序列依賴性擴(kuò)增(NASBA)、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增(TMA) 。
【病毒感染機(jī)制】
HIV病毒侵入人體后，其表面糖蛋白gp120與細(xì)胞表面受體蛋白CD4以高親和力結(jié)合，吸附到宿主細(xì)胞上;gp120再與宿主細(xì)胞表面輔助受體相互作用，使病毒與宿主細(xì)胞膜更接近;gp41產(chǎn)生一系列構(gòu)象變化，其N端的融合肽片段插入宿主細(xì)胞膜，導(dǎo)致病毒包膜與細(xì)胞膜的最終融合，病毒RNA進(jìn)入細(xì)胞。在HIV感染后，最先能夠監(jiān)測到病毒RNA、然后是p24抗原，最后是抗體。常見的檢測如下：
1.血液檢查：
A) 血常規(guī)：常有紅細(xì)胞，血紅蛋白降低，呈輕度正色素、正細(xì)胞性貧血。白細(xì)胞常降至4.0×109/L以下。分類中性粒細(xì)胞增加，有核左移現(xiàn)象。少數(shù)表現(xiàn)為粒細(xì)胞減少。淋巴細(xì)胞明顯減少，多<1.0×109/L 。有漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞和含空泡的單核細(xì)胞出現(xiàn)。血小板一般無變化，一旦有變化，血小板可明顯減少。
B) β2 -微球蛋白和新蝶呤(neopterin) 用放射免疫法(RIA)測定血清β2微球蛋白和新蝶呤。它們是被激活的巨噬細(xì)胞的產(chǎn)物，其血清水平的升高意味著免疫激活，具有與CD4 T細(xì)胞絕對計數(shù)、淋巴細(xì)胞百分率、CD4/CD8細(xì)胞比例下降同樣的臨床意義，即預(yù)示病情進(jìn)展至獲得性免疫缺陷綜合征。
2.免疫系統(tǒng)檢測：
(1)淋巴細(xì)胞亞群檢查：CD4 T細(xì)胞減少，CD4/CD8比例下降，正常人CD4/CD8之比為1.75～2.1，而獲得性免疫缺陷綜合征患者常<1.0。
(2)T細(xì)胞功能下降：遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)性皮試陰性。體外非特異性有絲分裂原刺激時，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化降低。T細(xì)胞的細(xì)胞毒作用降低。T細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-2和干擾素γ減少。
(3)B細(xì)胞功能失調(diào)：有不同程度的免疫球蛋白及免疫復(fù)合物升高。出現(xiàn)自身抗體，如產(chǎn)生RF、抗核抗體和抗淋巴細(xì)胞抗體等。
(4)自然殺傷細(xì)胞活性下降。
(5)淋巴結(jié)活檢:在獲得性免疫缺陷綜合征的高發(fā)地區(qū)及高危人群中，對腹股溝以外部位的淋巴結(jié)腫大，特別是持續(xù)性頸部淋巴結(jié)腫大的人普遍進(jìn)行淋巴結(jié)活檢是重要的措施，可見到淋巴結(jié)的反應(yīng)性病變和腫瘤性病變等非特異的、但具有一定診斷價值的病理表現(xiàn)。有的獲得性免疫缺陷綜合征患者，表淺淋巴結(jié)消失，不易做活檢。
3.其他 小便檢查常有蛋白尿。血中肌酸酐和尿素氮可升高。
4.病原學(xué)檢查
(1)HIV-1的病原學(xué)檢查：
A) HIV-1血清抗體的檢測：包括抗-gp120及抗-P24，大多數(shù)HIV-1感染者在3個月內(nèi)血清抗體陽轉(zhuǎn)。因而，測定血清抗體是目前確定有無HIV感染的最簡便、快速而有效的方法。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，間接免疫熒光測定(IFA)，放射免疫試驗(yàn)(RIA)等。一般多用ELISA法作初查，其靈敏性為99.5%。但由于它是用HIV-1作為抗原進(jìn)行檢測，與淋巴細(xì)胞抗原有交叉抗體，可有假陽性出現(xiàn)。故對初查陽性者，再用硝酸纖維膜免疫印跡試驗(yàn)(Westen blot，WB)確認(rèn)。
硝酸纖維膜雜交試驗(yàn)特異性強(qiáng)，假陽性率極低。其診斷標(biāo)準(zhǔn)是：如ELISA連續(xù)兩次陽性，且WB檢測出現(xiàn)p24，gp41，gp120或gp160條帶中任何兩條條帶陽性者，則可確認(rèn)為HIV感染。如沒有兩條條帶陽性者，則只能診為“未定型”(indeterminate pattern)。這時可用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測其特異的病毒核酸，或繼續(xù)密切觀察，反復(fù)作上述檢測，以明確診斷。
B) 檢測病毒抗原：由于抗體出現(xiàn)晚于抗原，因而不能早期診斷。如果在抗HIV-1陽轉(zhuǎn)之前的窗口期篩選獻(xiàn)血員，就會出現(xiàn)假陰性，后果是非常嚴(yán)重的。因此，篩選獻(xiàn)血員最好加測病毒抗原。通常檢測P24，其靈敏性及特異性均較高。既有助于早期診斷，也可用于獻(xiàn)血員篩選、藥物療效考核等。
C) 檢測病毒核酸：在抗HIV-1陽轉(zhuǎn)之前的窗口期，還可用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測HIV RNA。此法靈敏度更高，檢測周期短，也有助于早期發(fā)現(xiàn)、獻(xiàn)血員篩選、藥物療效考核等。但操作必須十分小心，防止污染，以避免假陽性。
D) 病毒分離和培養(yǎng)：從患者的淋巴細(xì)胞、血液、精液及其他體液中均可分離出病毒，陽性率較高，反復(fù)多次分離陽性率可達(dá)100%。分離的病毒可用CD4 T細(xì)胞培養(yǎng)。但方法復(fù)雜，成本較高，一般只用于實(shí)驗(yàn)室研究。分離或培養(yǎng)到HIV均為確診的依據(jù)。
(2)HIV-2的病原學(xué)檢查：血清學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)約80%的HIV- 1和HIV-2感染之間存在交叉反應(yīng)。故用于檢測HIV-1感染的ELISA和RIBA法難以確定HIV-2感染。特別是發(fā)生了HIV-l和HIV-2雙重感染時，使診斷更為困難。不過，HIV-2特異的ELISA及WB法藥盒現(xiàn)已有商品出售。在HIV-2流行區(qū)，可在檢測HIV-1的基礎(chǔ)上，先用HIV-2特異的ELISA藥盒區(qū)別HIV-1和HIV-2感染，再用HIV-2特異的WB法作確認(rèn)試驗(yàn)。在非流行區(qū)，當(dāng)HIV-1試驗(yàn)陽性或弱陽性，而WB法不明確或陰性，或臨床懷疑獲得性免疫缺陷綜合征，而HIV-1試驗(yàn)弱陽性、WB法陰性時，也要用HIV-2特異的ELISA藥盒檢測，以明確診斷。
近來為了節(jié)省時間和經(jīng)費(fèi)，大部分試劑盒廠家和血庫采用HIV-1和HIV-2抗體聯(lián)合測定。聯(lián)合測定的ELISA模式與HIV-1抗體測定相同，不同的是在包被固相載體時用HIV-1和HIV-2二種抗原的混合物替代單一的HIV-1抗原。
【并發(fā)癥相關(guān)檢測】
本病極易并發(fā)機(jī)會性感染和惡性腫瘤，并常死于這些并發(fā)癥。因此，對本病患者進(jìn)行胸部及胃腸道X線檢查，及早作出機(jī)會性感染和惡性腫瘤的診斷，對及時治療和延長患者的生命是十分重要的。
1.消化道X線檢查 胃腸道機(jī)會性感染主要的病原體是巨細(xì)胞病毒，惡性腫瘤仍以卡波齊肉瘤為常見。
(1)巨細(xì)胞病毒感染：巨細(xì)胞病毒可侵犯胃腸道的任何部位，但以結(jié)腸最為常見，個別病例可累及整個胃腸道。巨細(xì)胞病毒性食管炎或胃炎在X線片上表現(xiàn)為黏膜皺襞腫脹，小的充盈缺損及淺表潰瘍或糜爛等。巨細(xì)胞病毒性結(jié)腸炎病變有散在性及局灶性兩種。散在性者病變侵犯整個胃腸道，但程度不一。鋇灌腸示結(jié)腸袋形消失，腸腔輕度狹窄，腸黏膜可有肉芽腫、糜爛及淺表潰瘍等。節(jié)段性者以侵犯盲腸及末端回腸為主。X線造影顯示盲腸痙攣，黏膜皺襞不規(guī)則增厚及表淺的鵝口瘡樣潰瘍，但應(yīng)與潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病的X線表現(xiàn)相鑒別。上述X線表現(xiàn)均為非特異性的，應(yīng)結(jié)合臨床資料進(jìn)行分析。必要時應(yīng)配合內(nèi)鏡加活檢以確診。
(2)卡波齊肉瘤：卡波齊肉瘤可發(fā)生在胃腸道的任何部位。食管卡波齊肉瘤在X線片上顯示食管中段呈多發(fā)性腔內(nèi)息肉樣病變。胃卡波齊肉瘤表現(xiàn)為胃遠(yuǎn)端散在性、多發(fā)性無蒂的黏膜下缺損，輪廓光滑，直徑幾毫米至幾厘米。少數(shù)病變中央有鋇劑積聚，顯示“牛眼征”，在充氣擴(kuò)張的胃內(nèi)還可見不規(guī)則增厚的黏膜皺襞。十二指腸卡波齊肉瘤為球部內(nèi)黏膜下結(jié)節(jié)或輕度斑片狀隆起。小腸卡波齊肉瘤為多發(fā)性結(jié)節(jié)伴中央潰瘍。結(jié)腸卡波齊肉瘤以直腸最明顯，表現(xiàn)為整個結(jié)腸黏膜下散在的結(jié)節(jié)狀充盈缺損，直徑幾毫米至幾厘米不等。較晚期患者結(jié)節(jié)融合和環(huán)形浸潤腸壁，使直腸狹窄和僵直。
2.胸部X線檢查 常見的機(jī)會性感染有卡氏肺孢菌肺炎，惡性腫瘤有卡波齊(Kaposi)肉瘤。
(1)卡氏肺孢菌肺炎：典型X線表現(xiàn)是：初起時兩肺先出現(xiàn)混合性肺泡及間質(zhì)炎性改變，以肺門周圍散在性網(wǎng)狀結(jié)節(jié)樣間質(zhì)浸潤為主，從肺門向外擴(kuò)展。隨后在數(shù)日內(nèi)病變進(jìn)入肺泡，發(fā)展成肺泡性實(shí)變，在肺野內(nèi)形成均勻斑片狀實(shí)變影，其間夾雜有廣泛性或局灶性肺氣腫或小段肺不張，以肺外圍最明顯。呈粗糙的或細(xì)顆粒狀的“毛玻璃樣”表現(xiàn)，病變可僅限于一個肺葉，也可彌漫分布。有時片狀陰影可融合成大片狀均勻致密的浸潤影，呈向心性分布，與肺水腫的X線特征很相似。也可在“毛玻璃樣”背景上出現(xiàn)結(jié)節(jié)狀病灶。在肺周圍還可有條狀陰影，有些則僅表現(xiàn)為粗結(jié)節(jié)陰影。但這些X線表現(xiàn)沒有特異性，確診需要反復(fù)經(jīng)纖維支氣管鏡檢找到病原。不典型X線表現(xiàn)有：肺大葉性實(shí)變，可一葉也可多葉實(shí)變;肺空腔形成或胸腔積液;肺泡內(nèi)滲出物亦可鈣化等。應(yīng)注意與肺結(jié)核或肺部真菌感染相鑒別。胸內(nèi)淋巴結(jié)增大，主要是位于縱隔、右氣管旁及兩側(cè)肺門的淋巴結(jié)增大。有的病例甚至無呼吸系統(tǒng)癥狀出現(xiàn)，而僅于X線片上顯示胸內(nèi)淋巴結(jié)增大，以后才被證實(shí)為獲得性免疫缺陷綜合征。此種X線表現(xiàn)強(qiáng)烈提示肺內(nèi)有嚴(yán)重感染或腫瘤存在，需作纖維支氣管鏡或淋巴結(jié)活檢。
(2)卡波齊肉瘤：最常見的X線異常是肺間質(zhì)浸潤，約占肺卡波齊肉瘤患者的80%。此外，可見肺野內(nèi)直徑<1cm的、境界不清楚的多發(fā)性小結(jié)節(jié)影及明顯的條狀陰影。常伴有縱隔及肺門淋巴結(jié)增大，也可有胸腔積液。當(dāng)X線表現(xiàn)不明顯時，CT檢查有助診斷。
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