根據(jù)衛(wèi)生部規(guī)定,HIV-1抗體陽(yáng)性報(bào)告必須由衛(wèi)生部認(rèn)證并取得資格的HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室出具才有法律效應(yīng)。
最常用的HIV-1抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方法是免疫印跡法(Wwstern Blot,WB)和條帶免疫印跡法(Strip Immunoblot Assay, SIA或Linear Immunoblot Assay, LIA),其中以WB法最常用。
1.免疫印跡法 H IV抗體確認(rèn)的首選方法,他能同時(shí)檢測(cè)不同HIV-1抗原組分的抗體,因此能夠鑒別或肯定初篩檢測(cè)的結(jié)果。
2.條帶免疫印跡法 WB實(shí)驗(yàn)基本相同,只是條膜上抗原來(lái)源和組成有所區(qū)別。檢測(cè)時(shí)信噪比高,本地清晰,無(wú)潛在假陽(yáng)性干擾,且可通過(guò)調(diào)整條膜上HIV抗原量,克服了WB實(shí)驗(yàn)中使用病毒裂解產(chǎn)物而可能產(chǎn)生的固相載體上某些重要抗原量不足的缺點(diǎn)。這類(lèi)試劑特異性很高,但也可能由于病毒株在所合成抗原決定簇部位發(fā)生突變導(dǎo)致HIV抗體假陰性結(jié)果;另一個(gè)缺點(diǎn)是由于合成抗原不能糖基化,其立體構(gòu)像與天然抗原分子有一定差異,在一定程度上可能影響了模擬真實(shí)HIV抗原檢測(cè)抗體的能力。
HIV-1抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià) 免疫印跡實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是根據(jù)硝酸纖維素條膜特異性HIV抗原位置上出現(xiàn)的帶型不同來(lái)判斷HIV抗體為陽(yáng)性、陰性和不確定。
陽(yáng)性和陰性結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn):美國(guó)CDC的標(biāo)準(zhǔn)為國(guó)際公認(rèn)。
陽(yáng)性和陰性結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)
HIV-1抗體陽(yáng)性
HIV-1抗體陰性
僅gp41 沒(méi)有條帶;零星條帶
Gp120/gp160加上gp41或P24
HIV抗體不確定(或可疑)結(jié)果的評(píng)價(jià) 在某些情況下,樣品顯示不典型的HIV反應(yīng)性條帶圖譜,既不能確定為陽(yáng)性也不能確定為陰性,稱(chēng)為HIV抗體不確定或可疑陽(yáng)性。
以下原因可能導(dǎo)致HIV-1抗體不確定結(jié)果的出現(xiàn):①HIV-1急性感染后,抗體剛出現(xiàn),僅顯示gp160或120,或P24,P31,P55帶;此時(shí)ELISA往往已顯示陽(yáng)性反應(yīng);②非特異反應(yīng),如在高丙球蛋白血癥,某些病毒性疾病和寄生蟲(chóng)感染,自身免疫性疾病等情況下可出現(xiàn)該現(xiàn)象;③極少數(shù)晚期艾滋病患者;④與HIV裂解物中的宿主細(xì)胞成分發(fā)生交叉反應(yīng);⑤樣本交叉污染。
對(duì)HIV抗體不確定的受檢者必須進(jìn)行隨訪,通常為每3個(gè)月1次,共隨訪2次。如隨訪過(guò)程中出現(xiàn)特異性HIV抗體反應(yīng)條帶如gp160或120,則做出HIV-1抗體陽(yáng)性結(jié)論。如隨訪6個(gè)月后帶型消失或沒(méi)有變化,則做出HIV抗體陰性報(bào)告
























