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淋病患者做的檢查項目

2012-04-10 00:39來源:99健康網(wǎng)

導(dǎo)語
涂片,培養(yǎng)檢查淋球菌、抗原檢測,藥敏試驗及PPNG測定,基因診斷等均為淋球菌實驗室檢查項目。

        淋球菌實驗室檢查包括涂片,培養(yǎng)檢查淋球菌、抗原檢測,藥敏試驗及PPNG測定,基因診斷。

 。ㄒ唬┩科瑱z查:

  取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為50-60%,且有假陽性,因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。

  咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因為其他奈瑟菌屬在咽部是正常的菌群。另外對癥狀不典型的涂片陽性應(yīng)作進(jìn)一步檢查。

 。ǘ┡囵B(yǎng)檢查:

  淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對癥狀很輕或無癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。

  (三)抗原檢測

  1.固相酶免疫試驗(EIA):可用來檢測臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長時間遠(yuǎn)送時使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。

  2.直接免疫熒光試驗:通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免

  疫熒光試驗。但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實驗人員的判斷水平,故該實驗尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。

 。ㄋ模┗蛟\斷

  1.淋球菌的基因探針診斷

  淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。

  2、淋球菌的基因擴(kuò)增檢測

  上面講述的探針技術(shù)檢測淋球菌的方法,雖然比培養(yǎng)方法在靈敏度,特異性和方便性上有了很大的提高,但其仍有一定的局限性,如多數(shù)情況下需要標(biāo)本的淋球菌濃度很高,PCR技術(shù)和連接酶鏈反應(yīng)的出現(xiàn)進(jìn)一步提高了檢測淋球菌的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡便的優(yōu)點,可以直接檢測臨床標(biāo)本中極微量的病原體。

  3. 臨床基因診斷淋球菌的注意事項

  目前臨床檢測淋球菌的基因診斷方法主要采用PCR方法,但是該方法在臨床檢測中應(yīng)注意幾個問題。

 。1)引物設(shè)計 除了以上所列的淋球菌PCR引物外,還可從在其它基因上設(shè)計,但是引物序列應(yīng)具有特異性。因為細(xì)菌的染色體較大,許多基因序列并沒有搞清楚;同時細(xì)菌之間或近或遠(yuǎn)有一定的同源性,而且細(xì)菌所含質(zhì)粒序列間也存在同源性,因此設(shè)計引物一定要進(jìn)行基因數(shù)據(jù)庫比較分析,同時進(jìn)行特異性和靈敏性實驗,從中選擇引物進(jìn)行臨床檢測。

  (2)臨床標(biāo)本處理 對臨床標(biāo)本來講,PCR模板要求越純越好。這就要求在采集標(biāo)本時要取到準(zhǔn)確的位置,對于無癥狀患者要適當(dāng)多采樣,以保證采集到病原體細(xì)菌。另外由于臨床標(biāo)本成分比較復(fù)雜,有時簡單處理的標(biāo)本PCR擴(kuò)增效果并不理想,這可能是由于雜質(zhì)過多造成的,需要進(jìn)一步純化,如用酚一氯仿抽提法純化,結(jié)果將會好轉(zhuǎn)。這種純化方法比較麻煩,目前已有商品化的DNA純化試劑盒,可以較簡便地從臨床標(biāo)本中提取高純度的DNA。

  (3)PCR產(chǎn)物的檢測方法 不久以前臨床PCR檢測淋球菌幾乎都采用電泳的方法進(jìn)行PCR產(chǎn)物的鑒定。該方法存在許多問題,如由于肉眼觀察的主觀性而造成假陽性和假陰性的結(jié)果。目前用雜交顯色法代替電泳法,提高了結(jié)果判斷的特異性和靈敏性。

  總之,PCR方法與LCP方法比傳統(tǒng)的培養(yǎng)法在靈敏性和特異性上有了很大的提高,時間也大大縮短。隨著基因診斷技術(shù)的不斷改進(jìn)。PCR方法與LCP方法在淋球菌的檢測將會成為常規(guī)的檢測方法。

  (五)藥敏試驗:在培養(yǎng)陽性后進(jìn)一步作藥敏試驗。用紙片擴(kuò)散法做敏感試驗,或用瓊脂平皿稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC),用以指導(dǎo)選用抗生素。

  (六)PPNG檢測:β-內(nèi)酰胺酶,用紙片酸度定量法,使用Whatman I號濾紙PP-NG菌株能使其顏色由藍(lán)變黃,陽性為PPNG,陰性為N-PPNG。

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